تعیین ژنوتیپ مایت واروآ دستراکتور(Acari: Varroidae) با استفاده از تکنیک PCR-RFLP در زنبورستان های شهرستان ارومیه

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

1 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران.

2 گروه پاتوبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران

3 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه ، ایران

چکیده

واروازیس بیماری آلوده کننده زنبورهای عسل (Apis mellifera L.) است که توسط مایت واروا دستراکتور ایجاد می شود. مایت واروا دارای دو ژنوتیپ K و J می باشد. تفاوت در ژنوتیپ مایت واروا در میزان بیماری زایی آن موثر می باشد. هدف از این مطالعه شناسایی ژنوتیپ های مایت واروآ دستراکتور آلوده کننده زنبور عسل با استفاده از تکنیک PCR-RFLP و بر اساس ژن cox1 در زنبورستان های شهرستان ارومیه بود. بدین منظورتعداد200 مایت از زنبورستان های مناطق مختلف شهرستان ارومیه جمع آوری گردید. جهت تعیین ژنوتیپ مایت ها، دو جفت پرایمر اختصاصی انتخاب شد. قطعه مورد انتظار 570 جفت باز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تکثیر گردید. آنزیم های محدود کننده XhoI و SacI برای شناسایی ژنوتیپ واروآ دستراکتور مورد استفاده قرار گرفت. آنزیم SacI برشی در DNA ایجاد نکرد، در حالی که آنزیم محدود کننده XhoI، موجب دو برش در قطعه DNA به اندازه 270 و 300 جفت بازشد. این دو باند، اختصاصی برای ژنوتیپ کره ای مایت واروآ دستراکتور بود. بنابراین بر اساس نتایج بدست آمده تمام 200 نمونه مایت واروآ دستراکتور جمع آوری شده از زنبورستان های شهرستان ارومیه متعلق به ژنوتیپ کره ای بودند. با توجه به نتایج این مطالعه و ارتباط نوع ژنوتیپ مایت با میزان بیماری زایی آن می توان روش های درمان و کنترل جدیدی در زنبورستان های این منطقه مورد استفاده قرار داد.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Genotyping of Varroa destructor (Acari: Varroidae) in honey bee colonies of Urmia by PCR-RFLP

نویسندگان [English]

  • Gzing Jolfaie 1
  • Farnaz Malekifard 2
  • Mousa Tavassoli 3
1 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran.
2 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine,, Urmia University, Urmia,, Iran
3 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran
چکیده [English]

Varroosis is a disease of Apis mellifera L. caused by the mite Varroa destructor. V. destructor is a complex species and has two distinct Korean (K) and Japanese (J) genotypes. Different Varroa genotypes appear to be important regarding the virulence of mite. The aim of the present study was to identify the haplotypes of the Varroa destructor mite which infects honeybees (Apis mellifera) in honey bee colonies in Urmia, using PCR-RFLP techniques for the mitochondrial Cox1 gene of the mite. For this purpose, 200 mites were collected from apiaries in different regions of Urmia city. In order to confirm the haplotype, two specific primer pairs were selected. A segment of DNA genome comprising 570 bp of nuclotides have been selected and amplified using the primer pair. XhoI and SacI restriction enzymes were used for the amplified products. Although, the SacI restriction enzyme did not cut the DNA, the XhoI restriction enzyme cut the amplified DNA into two fragments (bands), with the sizes of 270 and 300 bp two bands. While comparing the results, these bands were found specific for Korean haplotype of V. destructor. In conclusion, all the 200 samples of V. destructor examined in this study were identified to be the Korean genotype. According to the results of this study, and the relationship between type of genotype and its pathogenicity, new treatment and control methods can be used in the apiaries of this region.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Genotype
  • Varroa destructor
  • honey bee colonies
  • Urmia
  1. Anderson, D. L. and Fuchs. 1998. Two genetically distinct populations of Varroa jacobsoni with contrasting reproductive abilities on Apis mellifera. Journal of Apicultural Research 37: 69–78.
  2. Ayan, A., K. Ural, O. S., Aldemir and H. Tutun. 2017. Van Bölgesindeki bal arılarında (Apis mellifera) görünen Varroa destructor’un genetik karakterizasyonunun belirlenmesi. Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Dergisi5(2): 78-84.
  3. Dadgostar, S., and J. Nozari. 2018. Classical and geometric morphometric methods reveal differences between specimens of Varroa destructor (Mesostigmata: Varroidae) from seven provinces of Iran. Persian journal of acarology7(1): 51–60.
  4. de Guzman, L., T. E., Rinderer, J. A., Stelzer, and D. Anderson. 1998. Congruence of RAPD and mitochondrial DNA markers in assessing Varroa jacobsoniJournal of Apicultural Research 37(1): 49-51.
  5. Delfinado-Baker, M. 1988. Variability and biotypes of Varroa jacobsoni Oudemans 128: 567-568.
  6. Farjamfar, M., A., Saboori, J., González-Cabrera and C.S.H. Rodríguez. 2018. Genetic variability and pyrethroid susceptibility of the parasitic honey bee mite Varroa destructor (Acari: Varroidae) in Iran. Experimental and Applied Acarology 76(1): 139–148.
  7. Fries, I., F. Feng, A. da Silva, S. B. Slemenda and N. J. Pieniazek. 1996. Nosema ceranae sp.(Microspora, Nosematidae), morphological and molecular characterization of a microsporidian parasite of the Asian honey bee Apis cerana (Hymenoptera, Apidae). European Journal of Protistology32(3): 356-365.
  8. Guzmán-Novoa, E., L., Eccles, Y. Calvete, J., Mcgowan, P. G. Kelly and A. Correa-Benítez. 2010. Varroa destructor is the main culprit for the death and reduced populations of overwintered honey bee (Apis mellifera) colonies in Ontario, Canada. Apidologie 41(4): 443-450.
  9. Hajializadeh, Z., M. Asadi and H. Kavousi. 2018. First report of Varroa genotype in western Asia based on genotype identification of Iranian Varroa destructor populations (Mesostigmata: Varroidae) using RAPD marker. Systematic and Applied Acarology 23(2): 199–205.
  10. Hajializadeh, Z., M. Asadi, K. Ahmadi and A. Balvasi. 2019. Varroa destructor (Acari: Varroidea) populations from Southern Iran belong to haplotype K of the mitochondrial COI. Persian Journal of Acarology: 8(2).
  11. Kelomey, A. E., A. Paraiso, H. Sina, H. Legout, L. Garnery, and L. Baba-Moussa. 2017. Genetic characterization of the honeybee ectoparasitic mite Varroa destructor from Benin (West Africa) using mitochondrial and microsatellite markers. Experimental and Applied Acarology72(1): 61-67.
  12. Macedo, P. A., J. Wu and M. D. Ellis. 2002. Using inert dusts to detect and assess varroa infestations in honey bee colonies. Journal of apicultural research41(1-2): 3-7.
  13. Mahmoodi, M., Sh. Basami, S., Nbian and A. Bahonar. 2010. Study On Some Possible Factors In Occurrence Of Colony Collapse Disorder In Ilam. Honeybee Science Journal 5:5-11(In Persian).
  14. Medina, L. M., and S. J. Martin 1999. A comparative study of Varroa jacobsoni reproduction in worker cells of honey bees (Apis mellifera) in England and Africanized bees in Yucatan, Mexico. Experimental & applied acarology23(8): 659-667.
  15. Moretto, G., L. S. Gonçalves, D. De Jong, and M. Z. Bichuette. 1991. The effects of climate and bee race on Varroa jacobsoni Oud infestations in Brazil. Apidologie22(3): 197-203.
  16. Mosadegh, M.S. and E. Komeili-Birjandi. 1991. Tick infestation of honey bees. pp. 20-67; 80-86; 101-103. 3rd (ed.), Shahid Chamran University publisher, Ahvaz, Iran.
  17. Moshaverinia, A., V. Abedi and H. Safaei. 2013. Mite infestation of honey bee (Apis mellifera) in apiaries of North East of Iran. Scientia Parasitologica14(1): 31-35.
  18. Muñoz, I., E. Garrido-Bailón, R. Martín-Hernández, A. Meana, M. Higes and P. De la Rúa. 2008). Genetic profile of Varroa destructor infesting Apis mellifera iberiensis colonies. Journal of apicultural research47(4): 310-313.
  19. Navajas, M., D. L. Anderson, L. I. De Guzman, Z. Y. Huang, J. Clement, T. Zhou and Y. Le Conte. 2010. New Asian types of Varroa destructor: a potential new threat for world apiculture. Apidologie41(2):181-193.
  20. Rasolofoarivao, H., J. Clémencet, L. H. R. Ravaomanarivo, D. Razafindrazaka, B. Reynaud and H. Delatte. 2013. Spread and strain determination of Varroa destructor (Acari: Varroidae) in Madagascar since its first report in 2010. Experimental and Applied Acarology 60(4): 521-530.
  21. Strapazzon, R., F. E. Carneiro, J. C. V. Guerra Jr and G. Moretto. 2009. Genetic characterization of the mite Varroa destructor (Acari: Varroidae) collected from honey bees Apis mellifera (Hymenoptera, Apidae) in the state of Santa Catarina, Brazil. Genetics and Molecular Research8(3): 990-997.
  22. Warrit, N., T. A. Hagen, D. R. Smith, and I. Çakmak. 2004. A survey of Varroa destructor strains on Apis mellifera in Turkey. Journal of Apicultural Research43(4): 190-191.
  23. Wines, M. 2013. Mystery malady kills more bees, heightening worry on farms. New York Times28(3).