بررسی نقش آزمایشگاه و آنتی‌ژن در تکرارپذیری نتیجه آزمون ممانعت از هماگلوتیناسیون بیماری نیوکاسل

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

1 گروه میکروبیولوژی و ایمنی‌شناسی ،دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران ، تهران ، ایران

2 بخش تحقیق و تشخیص بیماری‌های طیور، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

3 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، کرج، ایران

چکیده

آزمون ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI) یک روش رایج در آزمایشگاه‌های دامپزشکی می‌باشد که دارای حساسیت پایین و ویژگی بالایی در تعیین سطح آنتی‌بادی می‌باشد. هدف این مطالعه بررسی تکرارپذیری آزمون HI در بین آزمایشگاه‌های دامپزشکی و تعیین آنتی‌ژن مناسب برای آزمون HI بود. دو مطالعه در این تحقیق صورت پذیرفت. در مطالعه اول 60 نمونه سرم در چهار گروه شامل گروه سرم‌های تیتر منفی،  تیتر پایین،  تیتر متوسط و تیتر بالای نیوکاسل انتخاب شد. همچنین جهت ارزیابی تکرارپذیری نتایج آزمون HI هشت جفت سرم تکراری از هر چهارگروه سرمی انتخاب گردید. سرم‌ها به یازده آزمایشگاه مختلف دامپزشکی در کشور که سهم بالایی در انجام آزمون HI داشتند، ارسال گردید و از آنها درخواست شد با روش رایج آزمایشگاه تیتر HI نیوکاسل را تعیین کنند. در مطالعه دوم  41 نمونه سرم با استفاده از پنچ آنتی‌ژن (کلون‌لاسوتا، لاسوتا، B1، آنتی‌ژن تجاری، آنتی‌ژن آزمایشگاهی) برای آزمون HI مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج مطالعه اول نشان داد که اکثر آزمایشگاه‌ها توانایی شناسایی تیترهای بالا را دارند ولی در تعیین تیترهای صفر، پایین و متوسط تفاوت قابل‌توجهی دارند. همچنین براساس نتایج هر یک از آزمایشگاه‌ها مشخص شد که تکرارپذیری نتایج HI در داخل یک آزمایشگاه نیز پایین است. در مطالعه دوم بهترین آنتی‌ژن از لحاظ یکسان بودن پاسخ‌ها در آزمون HI آنتی‌ژن لاسوتاکلون می‌باشد. این اولین مطالعه کنترل کیفی آزمون HI در  ایران می‌باشد. نتایج نشان داد که کیفیت انجام HI در سطح قابل قبولی نیست و سازمان دامپزشکی و مراکز تحقیقاتی برای استاندارد‌سازی این آزمون برنامه‌ریزی نمایند.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Investigating the Role of Laboratory and Antigen in Repeatability of Results in Newcastle Virus Hemagglutination Inhibition

نویسندگان [English]

  • A. Ghalyanchi Langeroudi 1
  • Z. Ziafati Kafi 1
  • N. Sadri 1
  • L. Aghaeean 1
  • A. Modiri Hamedan 1
  • A. Hojabr Rajeoni 1
  • M. H. Fallah Mehrabadi 2
  • H. Hosseini, 3
1 Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
2 Department of Poultry Viral Diseases, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Karaj, Iran
3 Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran
چکیده [English]

Hemagglutination Inhibition (HI) test is a universal method in veterinary laboratories that has low sensitivity and high specificity in determining the level of antibody. This study aimed to evaluate the repeatability of HI test and to determine the suitable antigen for HI test. Two experiments were conducted in this study. In the first, 60 serum samples were divided into four groups, including negative, low, medium, and high titer serums for Newcastle virus. Also, to evaluate the repeatability of the HI test results, eight pairs of repeating serums were placed from all four serum groups. The sera were sent to 11 different veterinary laboratories, and asked to determine the Newcastle HI titers by standard protocols. In second experiment, 41 sera were used to determine the appropriate antigen using five antigens (Clone Lasota, Lasota, B1, commercial and laboratory antigen) for the HI test. the first experiment showed that most laboratories could identify high titers, but there is a significant difference in determining zero, low, and medium titers. Also, based on results obtained from each of laboratories, it was found that the reproducibility of HI results within a laboratory is low.  In the second experiment, the best antigen was determined in terms of the same answers for use in the HI antigen test of Lasota Clone vaccine. This study is the first study on the quality control of the HI in Iran. The results showed that the quality of test is not satisfactory, and the IVO and research centers should standardize this test.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Antigen
  • HI
  • Serum
  • Quality Control
  • Newcastle Disease
1- Ahmadi, E., S. A. Pourbakhsh, M. Ahmadi and A. Talebi. 2014. Pathotypic characterization of the Newcastle disease virus isolated from commercial poultry in northwest Iran. Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences 38: 383-387.
2- Beard, C., S. Hopkins  and J. Hammond. 1975. Preparation of Newcastle disease virus hemagglutination-inhibition test antigen. Avian diseases: 692-699.
3- Beard, C. and  W. Wilkes. 1985. A comparison of Newcastle disease hemagglutination-inhibition test results from diagnostic laboratories in the southeastern United States. Avian diseases: 1048-1056.
4- Brugh Jr, M., C. Beard and W. Wilkes. 1978. The influence of test conditions on Newcastle disease hemagglutination-inhibition titers. Avian diseases: 320-328.
5- Cox, R. M. and R. K. Plemper. 2017. Structure and organization of paramyxovirus particles. Current Opinion in Virology 24: 105-114.
6- Dimitrov, K. M., C. Abolnik, C. L.  Afonso, E. Albina, J.  Bahl,  M. Berg and et al. 2019. Updated unified phylogenetic classification system and revised nomenclature for Newcastle disease virus. Infection, Genetics and Evolution 74: 103917.
7- Dimitrov, K. M., A. M. Ramey, X. Qiu, J.  Bahl  and C. L. Afonso. 2016. Temporal, geographic, and host distribution of avian paramyxovirus 1 (Newcastle disease virus). Infection, genetics and evolution 39: 22-34.
8- Kaufmann, L., Syedbasha, M., Vogt, D., Hollenstein, Y., Hartmann, J., Linnik, J. E. and Egli, A. 2017. An Optimized Hemagglutination Inhibition (HI) Assay to Quantify Influenza-specific Antibody Titers. Journal  of  Visualized  Experiments 2017: 55833.
9- Mehrabanpour, M., M. R. Bushehri  and D. Mehrabanpour. 2017. Molecular and serological diagnosis of Newcastle and Ornithobacterium rhinotracheale broiler in chicken in Fars Province, Iran. International Journal of Biological, Biomolecular, Agricultural, Food and Biotechnological Engineering 11: 224-227.
10- Nagai, Y., H. D. Klenk and R. Rott. (1976). Proteolytic cleavage of the viral glycoproteins and its significance for the virulence of Newcastle disease virus. Virology 72: 494-508.
11- Rajmani, R. S., S. K. Gupta, P. K. Singh, P. K. Gandham, A. P.  Sahoo, U. Chaturvedi  and A. K. Tiwari. 2016. HN protein of Newcastle disease virus sensitizes HeLa cells to TNF-α-induced apoptosis by downregulating NF-κB expression. Archive Virology 161: 2395-2405.
12- Reber, A. and  J.  Katz. 2013. Immunological assessment of influenza vaccines and immune correlates of protection. expert review vaccines 12: 519-536.
13- Saadat, Y., S. A. Ghafouri, F.  Tehrani and A. G. Langeroudi. 2014. An active serological survey of antibodies to newcastle disease and avian influenza (H9N2) viruses in the unvaccinated backyard poultry in Bushehr province,Iran, 2012–2013. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 4: S213-S216.
14- Sabouri, F., M. Vasfi Marandi and M. Bashashati. 2018. Characterization of a novel VIIl sub-genotype of Newcastle disease virus circulating in Iran. Avian Pathol 47: 90-99.
15- Stephenson, I., A. Heath, D.  Major, R. W.  Newman, K.  Hoschler, W.  Junzi, J. M. Katz, J. P.  Weir, M. C.  Zambon  and J. M. Wood. 2009. Reproducibility of serologic assays for influenza virus A (H5N1). Emerging infectious diseases 15: 1250.
16- Zacour, M., B. J. Ward, A.  Brewer, P.  Tang, G.  Boivin, Y.  Li, M.  Warhuus, S. A.  McNeil, J. J. LeBlanc  and T. F. Hatchette. 2016. Standardization of hemagglutination inhibition assay for influenza serology allows for high reproducibility between laboratories. Clinical Vaccine Immunology 23: 236-242.