ارزیابی سوبستراهای سلولی مورد استفاده در تحقیق و تولید فرآورده‌های بیولوژیک از نظر آلودگی به ویروس های BVD 1&2

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

چکیده

    همزمان با گسترش تولید واکسن بر روی محیط‌های کشت سلولی، شناسایی و از بین بردن ویروس‌های ناخواسته آلوده‌کننده محیط‌های کشت با منشاء حیوانی، و همچنین پیشگیری از آلودگی فرآورده بیولوژیک ناشی ازمحیط‌های کشت سلولی به یکی از دغدغه‌های اصلی تولید‌کنندگان واکسن تبدیل شده است. این مطالعه با هدف بررسی آلودگی احتمالی سوبستراهای سلولی مورد مصرف در تحقیق و تولید فراورده‌های بیولوژیک موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی به ویروس‌های BVD1 و BVD2 انجام شد. در این پژوهش از تعداد 44 لاین سلولی با شماره‌های پاساژ و تاریخ های ذخیره‌سازی مختلف در مجموع 100 نمونه مورد بررسی قرار گرفت. پس از استخراج RNA از سلول‌های فوق، ابتدا با استفاده از روش Real Time PCR و بکارگیری یک جفت پرایمر برای شناسایی تمامی Pestivirus، آزمایش غربالگری انجام شد. در این آزمایش از بیوتایپ سایتوپاتیک NADL BVDV1a بعنوان کنترل مثبت استفاده شد. سپس به روش RT- PCR  گونه و زیرگونه آن‌ها تعیین شد. آلودگی در پنج سلول Hek293, IBRS2(BA F/9), RBK, FLK, RK13 دیده شد که همه سلول‌ها بجز IBRS2 در تایپینگ از نوع BVDV1b بودند. تمام سلول‌های مذکور در تحقیق و کنترل کیفی فراورده‌های بیولوژیک کاربرد دارند.  

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Evaluation of cellular substrates used in research and production of biological products for infection with BVDV 1 & 2

نویسندگان [English]

  • P Heybati
  • M Lotfi
  • A. Eshaghi
Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj
چکیده [English]

Simultaneously with the expansion of vaccine production on cell culture media, identification and elimination of adventitious viruses infecting culture media of animal origin, as well as prevention of contamination of biological products from cell culture media to one of the main concerns of production Vaccine suppliers. The aim of this study was to investigate the possible contamination of cellular substrates used in research and production of biological products of Razi Vaccine and Serum Research Institute with BVD1 and BVD2 viruses. The address of this investigate was 44 samples from 44 cell lines with different passage numbers and storage dates in a total of 100 samples. After extracting RNA from the above cells, a screening test was performed using Real Time PCR and a pair of primers to identify all Pestivirus. In this experiment, the cytopathic biotype BVDV1a NADL was used as a positive control. Then the species and their subspecies were determined by RT-PCR method. Infection was observed in five cells Hek293, IBRS2, RBK, FLK, RK13, all cells except IBRS2 in BVDV1b typing. All of these cells are used in research and quality control of biological products.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Virus
  • BVDV
  • Cell culture substrates
  • adventitious agents
  • Biological products

مراجع

1. Marcus-Sekura, C., et al., Evaluation of the Human Host Range of Bovine and Porcine Viruses that may Contaminate Bovine Serum and Porcine Trypsin Used in the Manufacture of Biological Products. Biologicals : journal of the International Association of Biological Standardization, 2011. 39(6): p. 359-369.
2. Rebecca Sheets , J.L., Gopa Raychaudhuri , John Petricciani, Adventitious agents, new technology, and risk assessment, 19e20 May 2011, Baltimore, MD. Biologicals, 2012. 40: p. 162-167.
3. Ranjbar, M. M., M. M. Ebrahimi, S. Shahsavandi, T. Farhadi, A. Mirjalili, M. Tebianian and M. H. Motedayen. 2019. Novel Applications of Immuno-bioinformatics in Vaccine and Bio-product Developments at Research Institutes. Archives of Razi Institute. 74: 219-233.
4. Sheets, R., et al., Adventitious agents, new technology, and risk assessment, 19–20 May 2011, Baltimore, MD. Biologicals, 2012. 40(2): p. 162-167.
5. Farsang, A. and G. Kulcsar, Extraneous agent detection in vaccines--a review of technical aspects. Biologicals, 2012. 40(4): p. 225-30.
6. Dodet, B., et al., Viral safety and extraneous agents testing for veterinary vaccines. Biologicals, 2010. 38(3): p. 326-331.
7. Bruckner, L., Viral safety and extraneous agents testing for veterinary vaccines: Rationale for requirements, the European approach. Biologicals, 2010. 38(3): p. 338-339.
8. Nicklas, W., V. Kraft, and B. Meyer, Contamination of transplantable tumors, cell lines, and monoclonal antibodies with rodent viruses. Lab Anim Sci, 1993. 43(4): p. 296-300.
9. Bauermann, F.V., et al., HoBi-like viruses: an emerging group of pestiviruses. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 2013. 25(1): p. 6-15.
10. Kirkland, P., et al., Identification of a novel virus in pigs—Bungowannah virus: a possible new species of pestivirus. Virus research, 2007. 129(1): p. 26-34.
11. Schirrmeier, H., et al., Genetic and antigenic characterization of an atypical pestivirus isolate, a putative member of a novel pestivirus species. Journal of General Virology, 2004. 85(12): p. 3647-3652.
12. Vilcek, S., et al., Characterization of a novel pestivirus originating from a pronghorn antelope. Virus research, 2005. 108(1-2): p. 187-193.
13. Hayflick, L., History of the development of human diploid cell strains (Opatija) in Proceedings, symposium on the characterization and uses of human diploid cell strains. 37- 54, 1963.
14. WHO, Requirements for Poliomyelitis Vaccine (Inactivated). In Requirements for Biological Substances: 1. General Requirements for Manufacturing Establishments and Control Laboratories; 2. Requirements for Poliomyelitis Vaccine (Inactivated). Report of a Study Group. In WHO Technical Report Series No. 178, World Health Organization, Geneva. 1959.
15. Hayflick, L., A brief history of cell substrates used for the preparation of human biologicals. Dev Biol, 2001. 106: p. 5-23.
16. WHO, Requirements for Poliomyelitis Vaccine (Oral). In Requirements for Biological Substances . In WHO Technical Report Series No. 486, World Health Organization,Geneva. No.7.
17. Symp, Proc Symp on Human Diploid Cell. Suggested methods for the management and testing of diploid cell culture used for virus vaccine production. Yugoslav Academy of Sciences and Art, Zagreb. P 213-216. 1970.
18. Tarmakova, S. S., S. Y. Sanzhieva and E. S. Nikolaeva. 2019. Impact of Phytobacterial Agent on the Toxic Damage to the Liver and Ileum of White Rats. Archives of Razi Institute. 74: 287-294.
19. Yolken, R., et al., Infantile gastroenteritis associated with excretion of pestivirus antigens. The Lancet, 1989. 333(8637): p. 517-520.
20. Yolken, R. Pestivirus infection in identicai twins discordant for schizophrenia. in Proceedings of the IXth Congress of Virology, Glasgow. 1993.
21. Potts, B., et al., Possible role of pestiviruses in microcephaly. The Lancet, 1987. 329(8539): p. 972-973.

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 01 شهریور 1399
  • تاریخ بازنگری: 18 شهریور 1399
  • تاریخ پذیرش: 20 شهریور 1399

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار