بررسی خصوصیات فنوتیپی و ژنوتیپی استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شده از شیر گاومیش های مبتلا به اورام پستان تحت کلینیکی دراطراف شهرستان ارومیه

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

1 دانش آموخته میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی، ارومیه- ایران

2 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ارومیه، ارومیه- ایران

3 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی، ارومیه- ایران

چکیده

ورم پستان تحت بالینی به عنوان یکی از بیماری‌های مهم در پرورش دام شیری مطرح می‌باشد. هدف از انجام این تحقیق ارزیابی خصوصیات فنوتیپی گونه استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر گاومیش های مبتلا به ورم پستان تحت بالینی دراطراف شهرستان ارومیه بود. برای این منظور نمونه شیر 480 کارتیه متعلق به 120 راس گاومیش شیری بطور جداگانه جمع آوری و آزمایش غربالگری با استفاده از آزمایش ورم پستان کالیفرنیائی (CMT) برای تشخیص ورم پستان تحت کلینیکی انجام گردید. روش‌های باکتریولوژی به همراه
آزمون‌های بیوشیمیائی جهت جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس در مورد کلیه نمونه ها انجام گرفت. جهت تأئید تشخیص و تعیین تیپ مولکولی، استخراج DNA از تمامی جدایه‌های استافیلوکوکوس اورئوس انجام گردیده و آزمون PCR نیز به ترتیب توسط پرایمرهای اختصاصی ژن nuc و spa صورت گرفت. بر اساس نتایج حاصل از بررسی خصوصیات کشت و آزمایشات تفریقی بیوشیمیایی در 76 کارتیه تحت آزمایش (8/15 درصد) آلودگی ناشی از گونه‌های مختلف استافیلوکوکوس گزارش گردید. استافیلوکوکوس اورئوس کواگولاز مثبت 5 مورد (57/6 درصد)، از کل سویه‌های استافیلوکوکوس جدا‌سازی شده را به خود اختصاص داد. تمامی ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس (100درصد) بر اساس آزمایش مولکولی مبتنی بر تکثیر ژن nuc مورد تأئید قرار گرفت. تنها یک باند الگوی متمایز (bp 1150) در بررسی ژن spa از ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس گزارش گردید. بطور کلی نتایج بدست آمده نشان می‌دهد به دلیل بالا بودن میزان آلودگی ناشی از گونه های استافیلوکوکوس در نمونه شیر گاومیش‌سهای اطراف شهرستان ارومیه شناسائی و کنترل استافیلوکوکوس اورئوس در فصول مختلف سال اهمیت به سزائی دارد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Phenotypic and genotypic characteristics of Staphylococcus aureus isolated from buffalo subclinical mastitis in suburb of Urmia

نویسندگان [English]

  • Sh. Kohestani, 1
  • A. Rastegarnia, 2
  • N. Taher Talatappeh, 3
1 Gratuated of Microbiology, Urmia Branch, Islamic Azad University, Urmia, Iran.;
2 Department of Clinical Science, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia Branch, Islamic Azad University, Urmia, Iran.
3 Department of Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia Branch, Islamic Azad University, Urmia, Iran.
چکیده [English]

Subclinical mastitis is one of the most costly diseases of dairy animals. The aim of this study was to evaluation of the phenotypic and genotype characteristics of Staphylococcus aurous strains isolated from buffalo milk with subclinical mastitis around the city of Urmia. A total of 480 quarter milk samples were collected from 120 dairy buffaloes and screened for subclinical mastitis by the aid of California Mastitis Test (CMT). In order to isolate S. aurous by cultural methods, bacteriological examinations with biochemical tests were done on all samples. For the diagnosis and determining the molecular types, extraction of DNA from all S. aurous isolates was performed by PCR as well as by the nuc and spa gene-specific primers were done. According to results of culture characteristics and biochemical tests in 76 quarter under test (15/8%) infections were reported from various species of Staphylococci. Coagulase-positive Staphylococcus aurous in 5 cases (6/57%), accounted for the isolation of staphylococci. All isolates of Staphylococcus aurous (100%) based on molecular tests based on Nuc gene replication was confirmed. Only a distinct pattern of bands (bp1150) in Spa gene of S. aurous isolates were reported. Overall, the results show the high levels of pollution caused by Staphylococcus species in milk samples of buffalo around the city of Uremia, identification and control of seasonal variation in Staphylococcus aurous is very important.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Staphylococcus aurous
  • mastitis
  • subclinical
  • Buffalo
1. Afrough P, Pourmand MR, Zeinalinia N, Yousefi M, Abdossamadi Z, Yazdchi SB. (2012). Molecular Typing of Clinical and Nasal Carriage Isolates of Staphylococcus aureus by spa Gene Patterns. Journal of Mazandaran University of Medical Sciences.;22(94):27-34.
2. Ahmady M, Kazemi S. (2012). Detection of the enterotoxigenic genes (sei, sej) in Staphylococcus aureus isolates from bovine mastitis milk in the West Azerbaijan of Iran. Comparative Clinical Pathology. (DOI 10.1007/s00580-012-1460-3):1-6.
3. Aires-de-Sousa M, Parente CE, Vieira-da-Motta O, Bonna IC, Silva DA, de Lencastre H. (2007). Characterization of Staphylococcus aureus isolates from buffalo, bovine, ovine, and caprine milk samples collected in Rio de Janeiro State, Brazil. Applied and environmental microbiology.;73(12):3845-9.
4. Ali M, Ahmad M, Muhammad K, Anjum A. (2011). Prevalence of sub clinical mastitis in dairy buffaloes of Punjab, Pakistan. Okara.;150(63):42
5. Atyabi N, Vodjgani M, Gharagozloo F, Bahonar A. (2006). Prevalence of bacterial mastitis in cattle from the farms around Tehran. Iranian Journal of Veterinary Research. 7(3 (Ser. 16)):76-9.
6. Carter GR, Cole Jr JR. (1990). Diagnostic procedure in veterinary bacteriology and mycology: Academic Press london.
7. Dhakal I. Normal somatic cell count and subclinical mastitis in Murrah buffaloes. (2006). Journal of Veterinary Medicine, Series B.;53(2):81-6.
8. De Medeiros ES, França CA, Krewer CdC, Peixoto RdM, de Souza Júnior AF, Cavalcante MB, et al. (2011). Antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. isolates from cases of mastitis in buffalo in Brazil. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation.;23(4):793-6.                                           
9.Fagiolo A, Lai O. Mastitis in buffalo. (2010).Italian Journal of Animal Science. 6(2s):200-6.
10. Ghorbanpour M, Seyfiabad S, Moatamedi H, Jamshidian M, Gouraninezhad S. (2007). Comparsion of microbial culture, PCR and CMT for diagnosis of dairy cattle,s staphylococal and subclinical mastitis. Scientific-Research Iranian Veterinary Journal..3,1(14):63-70.
11.Maniruzzaman M, Khan M, Amin M, Paul A, Islam M. (2010). Isolation and identifaction of bacterial flora from milk of apparently health buffalo-cows. Int J BioRes.;1(3):13-6.
12. Mirzaei H, Javadi A, Farajli M, Shah-Mohammadi A, Monadi A, Barzegar A. (2012). Prevalence of Staphylococcus aureus resistant to methicillin in traditional cheese and cream: a study in city of Tabriz, Iran. Journal of Veterinary Research.;67(1): 65-70.
13. Monecke S, Kuhnert P, Hotzel H, Slickers P, Ehricht R. (2007). Microarray based study on virulence-associated genes and resistance determinants of Staphylococcus aureus isolates from cattle. Veterinary microbiology.;125(1):128-40.
14. Oliveira AA, Pinheiro JW, Mota RA, Cunha ML, Lopes CA, Rocha NS. (2011). Phenotype characterization of Staphylococcus species strains isolated from buffalo (Bubalus bubalis) milk. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation.23(6):1208-11.
15. Özpinar N, Gumussoy KS. (2013). Phenotypic and Genotypic Determination of Antibiotic Resistant and Biofilm Forming Staphylococcus aureus Isolated in Erzincan Tulum Cheese. Kafkas Universitesi Veteriner Fakultesi Dergisi. 19(3:(517-521.
16. Quinn PJ, Carter M, Markey B, Carter GR. (1994).Clinical veterinary microbiology. Wolfe publishing  London.
17. Saei HD, Ahmadi M, Mardani K, Batavani RA. (2009). Molecular typing of Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis based on polymorphism of the coagulase gene in the north west of Iran. Veterinary Microbiology.137(1–2):202-6.
18. Saleem MY, Awan FN, Zaman T, Chaudhry  SR, and  Zoyfro V. (2011). Prevalence and Antibacterial Susceptibility in Mastitis in Buffalo and cow  around the district Lahore-Pakestan. Pak J Pharm. . 24( (1 & 2) ):29-33,.
19.Vagdi H, R, Farhoudi Mogadam M, Mirzaii H, Khakpour M. (2011). An evaluation of prevalence and cases of subclinical mastitis and its association with somatic cell count in buffaloes. VetRes Bull. 6(2):161-7.