بررسی اثر کشندگی پپتید CM11 بر پروتواسکولکس‌های کیست هیداتید

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.

چکیده

در مطالعه‌ی حاضر به منظور بررسی اثر کشندگی پپتید ضد میکروبی CM11 (پپتید خطی آلفا هلیکال با 11 اسید آمینه) بر روی کیست هیداتید گوسفند پروتواسکولکس‌های کیست هیداتید جمع‌آوری ‌شده و توسط سرم نمکی شستشو داده شدند. ابتدا درصد زنده‌مانی پروتواسکولکس‌ها با استفاده از رنگ ائوزین بررسی شد. جهت انجام مطالعه غلظت‌های مختلف پپتید CM11 (µmol 16، µmol 64، µmol 128 و µmol 256) در کنار گروه کنترل مثبت و منفی در مدت‌زمان‌های 30، 60، 120 و 240 دقیقه بر روی پروتواسکولکس‌ها اثر داده شدند. پس از طی زمان لازم با استفاده از رنگ حیاتی ائوزین رنگ‌آمیزی انجام و توسط دوربین مجهز به نرم‌افزار Tcapture عکس‌برداری انجام گردید. درنهایت شمارش پروتواسکولکس‌ها از روی عکس توسط نرم‌افزار ImageJ صورت گرفت و درصد زنده و مرده بودن پروتواسکولکس‌ها محاسبه گردید. تجزیه و تحلیل آماری داده‌ها توسط نرم‌افزار SigmaStat بررسی‌شده و مقادیر P Value کمتر از 05/0 معنی‌دار تلقی گردیدند. تا زمان 2 ساعت پس از مجاورت پپتید CM11 با پروتواسکولکس‌ها، اثر کلیه‌ی غلظت‌های مورد آزمایش پپتید بر روی پروتواسکولکس‌های کیست هیداتید در مقایسه با گروه کنترل منفی فاقد تفاوت معنی‌دار بود. اما پس از 4 ساعت مجاورت پروتواسکولکس با غلظت‌های µmol 128 و µmol 256 پپتید CM11، میزان زنده‌مانی پروتواسکولکس‌ها به‌صورت معنی‌دار کاهش یافت (05/0>P). با توجه به نتایج طرح حاضر و با توجه به مشکلات موجود در رابطه با عوارض و مقاومت داروهای ضد پروتواسکولکس موجود، پپتید CM11 می‌تواند به‌عنوان یک پپتید نسبتاً مؤثر بر ضد پروتواسکولکس کیست هیداتید در تحقیقات آینده مورداستفاده قرار گیرد. 

کلیدواژه‌ها

موضوعات

عنوان مقاله [English]

Investigation of scolicidal effect of CM11 on Hydatid cyst

نویسندگان [English]

  • Ali fathabadi
  • Elahe Ebrahimzadeh
  • Hassan Borji
  • Nima Komeili
Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran.
چکیده [English]

In present study, in order to evaluate scolicidal effect of CM11anti-microbial peptide (α-helical peptide with 11 amino acids) against hydatid cyst, Echinococcus granulosus protoscolices were collected and washed with normal saline. At first, the percentage of viability of protoscolices was evaluated using eosin staining. Different concentrations of CM11 peptide (16, 64, 128, and 256 μmol.), along with positive and negative control group, were used against protoscolices for 30, 60, 120 and 240 minutes. Eosin staining was done at the end of the incubation time, and the images were taken with a camera equipped with Tcapture software. Finally, the number of dead and live protoscolices was determined by ImageJ software, and the viability and mortality percent was calculated. Data analysis was carried out by using Sigma Stat (version 3.5). P value < 0.05 was considered statistically significant. Up to 2 hours, the effect of all concentrations of CM11 peptide on protoscolices was not significant compared to the negative control group. However, after 4 hours of exposure, 128 and 256 μm of peptide, were significantly decreased the viability of protoscolices (P<0.05). With regard to the results of this study and considering the resistance of the present antiprotoscolics drugs, the CM11 can be used as a relatively effective peptide against protoscolices in future research. 
 

کلیدواژه‌ها [English]

  • Hydatid cyst
  • CM11 peptide
  • Protoscolex
  • Invito assay

مراجع

1- Al-Malki, E. S. and N. Abdelsater. 2020. In vitro Scolicidal effects of Androctonus crassicauda (Olivier, 1807) venom against the protoscolices of Echinococcus granulosus. Saudi Journal of Biological Sciences 27: 1760-1765.
2- Amani, J., K. A Barjini, M. M Moghaddam and A. Asadi. 2015. In vitro synergistic effect of the CM11 antimicrobial peptide in combination with common antibiotics against clinical isolates of six species of multidrug-resistant pathogenic bacteria. Protein and peptide letters 22: 940-951.
3- Azad, M. B., A. M. Abou-Setta, B. F. Chauhan, R. Rabbani, J. Lys, L. Copstein, A. Mann, M. M. Jeyaraman, A. E. Reid and M. Fiander. 2017. Nonnutritive sweeteners and cardiometabolic health: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials and prospective cohort studies. Cmaj 189: E929-E939.
4- Cobb, S. L. and P. W. Denny. 2010. Antimicrobial peptides for leishmaniasis. Current opinion in investigational drugs 11: 868-875.
5- Dey, A. R., N. Begum, M. A. Alim and M. Z. Alam. Multiple anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes of small ruminants in Bangladesh. Parasitology international 77: 102105.
6- Ebrahimi, R., M. Yakhchali and H. Malekinejad. 2020. Anthelmintic resistance to Albendazole and Fenbendazole in gastrointestinal nematodes of sheep in Saghez Municipality, Iran. Journal of Veterinary Research 75(1):1-7.
7- Ebrahimzade, E., M. Mohebali, P. Shayan, S. Mohammadi-Yeganeh, M. M. Moghaddam, S. Elikaee, B. Akhoundi and M. K. Sharifi-Yazdi. 2019. Investigation of the antimicrobial activity of a short cationic peptide against promastigote and amastigote forms of Leishmania major (MHRO/IR/75/ER): An in vitro study. Experimental parasitology 196: 48-54.
8- Enkai, S., H. Kouguchi, D. K. Inaoka, T. Irie, K. Yagi and K. Kita. 2021. In vivo efficacy of combination therapy with albendazole and atovaquone against primary hydatid cysts in mice. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases 40: 1815-1820.
9- Ferre, R., E. Badosa, L. Feliu, M. Planas, E. Montesinos and E. Bardají. 2006. Inhibition of plant-pathogenic bacteria by short synthetic cecropin A-melittin hybrid peptides. Applied and Environmental Microbiology 72: 3302-3308.
10- HashemiTabar , Razmi.GR    and Maleki.M. 2009. In vivo effect of albendazole and mebendazole on hydatid cyst of mice. Archives of Razi Institute 64: 45-50.
11- Jafari. H, Nemati. M, Haddad Molayan, Khaleghi. P, Rostamkolaie.L and H. Nejat.H. 2019. Scolicidal activity of Mesobuthus eupeus venom against the protoscolices of Echinococcus granulosus. Archives of Razi Institute 74: 183-189.
12- Landa, A., L. Jiménez, K. Willms, L. F. Jiménez-García, R. Lara-Martínez, L. Robert, O. Cirioni, W. Barańska–Rybak and W. Kamysz. 2009. Antimicrobial peptides (Temporin A and Iseganan IB-367): Effect on the cysticerci of Taenia crassiceps. Molecular and biochemical parasitology 164: 126-130.
13- Maggiore, M. A., A. A. Albanese, L. B. Gende, M. J. Eguaras, G. M. Denegri and M. C. Elissondo. 2012. Anthelmintic effect of Mentha spp. essential oils on Echinococcus granulosus protoscoleces and metacestodes. Parasitology research 110: 1103-1112.
14- Mahmoudvand, H., A. Asadi, M. F. Harandi, F. Sharififar, S. Jahanbakhsh and E. S. Dezaki. 2014. In vitro lethal effects of various extracts of Nigella sativa seed on hydatid cyst protoscoleces. Iranian journal of basic medical sciences 17: 1001.
15- Moazeni, M., S. Larki, M. J. Saharkhiz, A. Oryan, M. Ansary Lari and A. Mootabi Alavi. 2014. In vivo study of the efficacy of the aromatic water of Zataria multiflora on hydatid cysts. Antimicrobial agents and chemotherapy 58: 6003-6008.
16- Moazeni, M. and A. Nazer. 2010. In vitro effectiveness of garlic (Allium sativum) extract on scolices of hydatid cyst. World journal of surgery 34: 2677-2681.
17- Moazeni, M., M. J. Saharkhiz and A. A. Hosseini. 2012. In vitro lethal effect of ajowan (Trachyspermum ammi L.) essential oil on hydatid cyst protoscoleces. Veterinary parasitology 187: 203-208.
18- Moghaddam, M. M., F. Abolhassani, H. Babavalian, R. Mirnejad, K. Azizi Barjini and J. Amani. 2012. Comparison of in vitro antibacterial activities of two cationic peptides CM15 and CM11 against five pathogenic bacteria: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Vibrio cholerae, Acinetobacter baumannii, and Escherichia coli. Probiotics and antimicrobial proteins 4: 133-139.
19- Morré, D. J., E. Sun, C. Geilen, L.-Y. Wu, R. De Cabo, K. Krasagakis, C. Orfanos and D. Morre. 1996. Capsaicin inhibits plasma membrane NADH oxidase and growth of human and mouse melanoma lines. European Journal of Cancer 32: 1995-2003.
20- Namaei, M. H., R. Solgi and A. Tavakoli Kareshk. 2022. Prosopis farcta Extract Potentiates the Scolicidal Activity Against Protoscolices of Hydatid Cysts. Proceedings of the National Academy of Sciences, India Section B: Biological Sciences: 1-6.
21- Rokni, M. 2009. Echinococcosis/hydatidosis in Iran. Iranian J Parasitol 4: 1-16.
22- Rouhani, S., N. Salehi, M. Kamalinejad and F. Zayeri. 2013. Efficacy of Berberis vulgaris aqueous extract on viability of Echinococcus granulosus protoscolices. Journal of Investigative Surgery 26: 347-351.
23- Sayek, I., M. B. Tirnaksiz and R. Dogan. 2004. Cystic hydatid disease: current trends in diagnosis and management. Surgery today 34: 987-996.
24- Sazmand, A., G. Alipoor, S. Zafari, S. M. Zolhavarieh, A. D. Alanazi and N. D. Sargison. 2020. Assessment of knowledge, attitudes and practices relating to parasitic diseases and anthelmintic resistance among livestock farmers in Hamedan, Iran. Frontiers in veterinary science 7: 584323.
25- Slocinska, M., P. Marciniak and G. Rosinski. 2008. Insects antiviral and anticancer peptides: new leads for the future Protein and peptide letters 15: 578-585.
26- Tamang, D. G. and M. H. Saier Jr. 2006. The cecropin superfamily of toxic peptides. Microbial Physiology 11: 94-103.
27- Thevissen, K., H.-H. Kristensen, B. P. Thomma, B. P. Cammue and I. E. Francois. 2007. Therapeutic potential of antifungal plant and insect defensins. Drug discovery today 12: 966-971.
28- Zhang, L. and T. J. Falla. 2009. Host defense peptides for use as potential therapeutics. Current opinion in investigational drugs (London, England: 2000) 10: 164-171.
 

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 14 اسفند 1401
  • تاریخ بازنگری: 31 اردیبهشت 1402
  • تاریخ پذیرش: 31 اردیبهشت 1402

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار