بررسی تاثیر عصاره هیدروالکلی گل راعی (.Hypericum perfortum L) بر زنده‌مانی پروتواسکولکس‌های اکینوکوکوس گرانولوزوس در شرایط آزمایشگاهی

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

1 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران.

2 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

3 گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران

4 مرکز تحقیقات داروهای گیاهی رازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران

چکیده

از چالش‌های عمده درمان هیداتیدوزیس حین جراحی، از بین بردن پروتواسکولکس‌های کیست هیداتیک جهت ممانعت از عود مجدد بیماری است. بدین منظور دستیابی به ترکیبات اسکولکس کش موثر و با عوارض جانبی کم ضروری می‌باشد. این مطالعه به منظور ارزیابی اثرات اسکولکس کشی عصاره هیدروالکلی گیاه گل راعی و تغییرات فراساختاری پروتواسکولکس های تیمار شده صورت گرفته است. پس از جمع‌آوری کیست هیداتیک کبدی از کشتارگاه، مایع کیست حاوی پروتواسکولکس‌های زنده آسپیره و میزان زنده‌مانی آنها به کمک رنگ آمیزی ائوزین 1/0 % سنجیده شد. سپس فعالیت پروتواسکولکس کشی عصاره هیدروالکلی گل راعی در غلظت‌های مختلف mg/ml 50، 100، 200، 300، 400 و 500 و مدت زمان‌های 10، 20، 30 و 60 دقیقه مورد بررسی قرار گرفت. همچنین پروتواسکولکس‌‌های تیمار شده با عصاره بوسیله میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM) ارزیابی و میزان سمیت عصاره توسط آزمایش MTT سنجیده شد. بیشترین فعالیت پروتواسکولکس کشی عصاره آبی-الکلی گل راعی در غلظت mg/ml 200 بعد از  30 دقیقه مواجهه دیده شد که موجب از بین رفتن همه پروتواسکولکس‌های تیمار شده گردید. تغییرات ساختمانی در سطح میکروسکوپ الکترونی با آسیب وسیع تگومنت، بهم ریختگی روستلوم و قلاب‌ها و یکپارچگی غشاء تگومنت در پروتواسکولکس‌های تیمار شده مشاهده شد. همچنین حداقل غلظت مهارکنندگی در مدت زمان 24 ساعت 8/564 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر محاسبه گردید. مطالعه حاضر نشان داد که عصاره هیدروالکلی گل راعی اثر پروتواسکولکس کشی قوی داشته و می‌تواند در حین جراحی به عنوان یک پروتواسکولکس کش مؤثر استفاده شود.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Evaluation of the effect of hydroalcoholic extract of Hypericum perfortum L. on survival of Echinococcus granulosus protoscolices in vitro

نویسندگان [English]

  • Mohammad Hossein Razi Jalali 1
  • Sara Larki 2
  • Khosro Mehdi Khanlou 3
  • ‪Kourosh Cheraghipour 4
  • Abdolrazagh ‪Marzban 4
  • Kiumars Nourmohammadi 1
1 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran.
2 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran
3 Department of Production Engineering and Plant Genetics, College of Agriculture, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran.
4 Razi Herbal Medicines Research Center, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran.
چکیده [English]

Hydrotidosis is a medical and veterinary disease that, in addition to causing significant economic damage to the livestock industry, can also threaten the health of humans. The elimination of hydatid cyst protoscolices is one of the major challenges of treating cysts during surgery. So, achieving an effective scolicidal compound with low side effects is essential for this purpose. In this study, St. John's Wort hydroalcoholic extract was used to evaluate protoscolices' viability and ultrastructural changes. Materials and Methods: After collecting hepatic hydatid cysts from the slaughterhouse, cyst fluid containing live protoscolices was aspirated under sterile conditions, then stored at 4 ° C in a refrigerator. Protoscolices were stained with 0.1% eosin to determine their survival rate. Then, the activity of the treated protoscolices with hydroalcoholic extract of St. John's wort was examined at different concentrations of 50, 100, 200, 300, 400, and 500 mg/ml for 10, 20, 30, and 60 minutes. For ultrastructural studies by scanning electron microscopy (SEM), the exposed protoscolices with plant extract were prepared. The growth inhibition was assayed using MTT (Methy Thiazol Tetrazolium) test. The result of the data was analyzed using statistical tests. Results: The highest protoscolecidal activity of Hypericum perfortum aqueous-alcoholic extract was observed at a concentration of 200 mg/ml after 30 minutes of exposure, resulting in the elimination of all treated protoscolices. Ultrastructural changes in treated protoscolices were observed as extensive tegument damage, loss of tegument integrity rostellum and hooks dislocation, and reduced protoscolices size. The half maximal inhibitory concentration (IC50) value was 564.8 mg/ml for 24 hours. Conclusion: The results of this study showed that the hydroalcoholic extract of St. John's wort has strong protoscolecidal effects. It can be used as an effective scolocidal composition in surgery methods.
 

کلیدواژه‌ها [English]

  • Hypericum perfortum L
  • Protoscolecidal
  • Hydatid cyst
1. Assadi, M., A. A. Ramak Maassoumi, M. Khatamsaz, V. Mozaffarian. 1990-2020.  Flora of Iran. Research Institute of Forests and Rangeland Press. Tehran. (In Farsi).
2. Arjmand-Shabestary, A., M. Khaloei, M. Arjomandzadegan, Z. Eslamirad and R. Ghasemikhah. 2017. Effects of Zataria, Mentha Pulegium, Oregano spp Essential Oil and Hydroalcholic Extract of Hypericum perforatum on Cyst of Acanthamoeba spp In Vitro. Journal of Arak University of Medical Sciences. 20(8) :1-8
3. Bouaziz, S., M. Amri, N. Taibi, R. Zeghir-Bouteldja, A. Benkhaled, D. Mezioug and C. Touil-Boukoffa. 2021. Protoscolicidal activity of Atriplex halimus leaves extract against Echinococcus granulosus protoscoleces. Experimental parasitology. 229: 108155. 
4. Cai, R., X. P. She, Y. Wang, W. Gong, H. Q. Zhang and C. M. Xia. 2014. In vitro effect of photoactivated hypericin on anti-Schistosoma japonicum adult male worms. Chinese journal of parasitology & parasitic diseases. 32(3): 176-179.
5. Cheraghipour, K., M. Beiranvand, M. Zivdari, S. Amiri, L. Masoori, M. Nourmohammadi, A. S. Maken-Ali, S. Abbaszadeh, K. Moradpour and A. Marzban. 2021. In vitro potential effect of Pipper longum methanolic extract against protoscolices of hydatid cysts. Experimental Parasitology. 221: 108051.
6. Crompton, C., I. Hall, K. Jensenm and P. Hildebrand. 1988. The biology of Canadian weeds. 83. Hypericum perforatum L. Canadian Journal of Plant Science. 68(1): 149-162.
7. De-Brum-Vieira, P., N. L. F. Silva, C. B. Menezes, M. V. da-Silva, D. B. Silva, N. P. Lopes, A. J. Macedo, J. Bastida and T. Tasca. 2017. Trichomonicidal and parasite membrane damaging activity of bidesmosic saponins from Manilkara rufula. PLoS One. 12(11): e0188531.
8. Feizi, F., S. Moradkhani, M. Matini, F. Parandin, A. Roushan and M. Fallah. 2015. To study the solicidal effects of the extracts of Ginger (Zingiber officinale) and Artemisia (Artemisia aucheri) on protoscoleces of hydratid cyst in vitro. Arak Medical University Journal. 18(101): 45-52. 
9. Galati, G. and P. J. O'Brien. 2004. Potential toxicity of flavonoids and other dietary phenolics: significance for their chemopreventive and anticancer properties. Free radical biology & medicine. 37(3): 287–303.
10. Ghasemi-Pirbalouti, A., G. R. Rahnama, F. Malekpoor and H. Roohi Broujeni. 2011. Variation in antibacterial activity and phenolic content of Hypericum scabrum L. populations. Journal of Medicinal Plant Research. 5(17): 4119-4125. 
11. Gul, R., S. U. Jan, S. Faridullah, S. Sherani and N. Jahan. 2017. Preliminary phytochemical screening, quantitative analysis of alkaloids, and antioxidant activity of crude plant extracts from Ephedra intermedia indigenous to Balochistan. Scientific World Journal. 3: 1-7.
12. Kohansal, M. H., A. Nourian, M. T. Rahimi, A. Daryani, A. Spotin and E. Ahmadpour. 2017. Natural products applied against hydatid cyst protoscolices: A review of past to present. Acta tropica. 176: 385-394. 
13. Kraft, K. and C. Hobbs. Pocket Guide to Herbal Medicine. pp.115-119. Thieme Stuttgart. New York.
14. Labsi, M., L. Khelifi, D. Mezioug, I. Soufli and C. Touil-Boukoffa. 2016. Antihydatic and immunomodulatory effects of Punica granatum peel aqueous extract in a murine model of echinococcosis. Asian Pacific journal of tropical medicine. 9(3): 211-220. 
15. Maurice, M. N., E. Huseein, M. Monib, F. M. Alsharif, N. I. Namazi, and A. A. Ahmad. 2021. Evaluation of the scolicidal activities of eugenol essential oil and its nanoemulsion against protoscoleces of hydatid cysts. Plos one. 16(11): e0259290.
16. McManus, D. P., W. Zhang and J. Li. 2003. Echinococcosis. Lancet. 362: 1295– 1304. 
17. Moloudizargari, M., P. Mikaili, S. Aghajanshakeri, M. H. Asghari and J. Shayegh. 2013. Pharmacological and therapeutic effects of Peganum harmala and its main alkaloids. Pharmacognosy reviews. 7(14): 199.
18. Montoya, A., A. Daza, D. Muñoz, K. Ríos, V. Taylor, D. Cedeño, I. D. Vélez, F. Echeverri and s. M. Robledo. 2015. Development of a novel formulation with hypericin to treat cutaneous leishmaniasis based on photodynamic therapy in in vitro and in vivo studies. Antimicrob Agents Chemother. 59(9): 5804-5813. 
19. Rajabi, M. A. 2009. Fatal reactions and methaemoglobinaemia after silver nitrate irrigation of hydatid cyst. Surgical practice. 13(1): 2–7. 
20. Ramírez-Macías, I., C. Marín, R. Chahboun, I. Messouri, F. Olmo, M. J. Rosales, R. Gutierrez-Sánchez, E. Alvarez-Manzaneda and M. Sánchez-Moreno. 2012. In vitro and in vivo studies of the trypanocidal activity of four terpenoid derivatives against Trypanosoma cruzi. American journal of tropical medicine and hygiene. 87(3): 481–488. 
21. Sen, S., B. De, N. Devanna and R. Chakraborty. 2013. Total phenolic, total flavonoid content, and antioxidant capacity of the leaves of Meyna spinosa Roxb., an Indian medicinal plant. Chinese journal of natural medicines. 11(2): 149-157.
22. Shinjyo, N., H. Nakayama, L. Li, K. Ishimaru, K. Hikosaka, N. Suzuki, H. Yoshida and K. Norose. 2021. Hypericum perforatum extract and hyperforin inhibit the growth of neurotropic parasite Toxoplasma gondii and infection-induced inflammatory responses of glial cells in vitro. Journal of ethnopharmacology. 267: 113525. 
23. Zulfikaroglu, B., N. Ozalp, M. Keskek and M. Koc. 2008. Primary echinococcal cyst of the thyroid: report of a case. Surgery today. 38: 833–835.